世界看点：酵母文库/酵母杂交Tips7 膜体系功能验证

膜体系筛库前，需对诱饵蛋白在酵母细胞中是否正确表达进行检测，即功能验证（functional assay），实验中用到的对照AD载体为pOst1-NubI。如果诱饵蛋白在酵母细胞中正确表达，并定位到酵母细胞膜上，同时与诱饵蛋白融合的Cub-LexA-VP16结构定位于细胞质侧，则其将与Ost1-NubI结构域互作，从而形成完整的泛素，激活报告基因表达。

实验设计

(相关资料图)

通过标准

Ø如果诱饵蛋白在该体系中正确表达，即构建的BD载体适应该体系，反应1在SD-trp-leu-his和SD-trp-leu-his-ade培养基上的生长率应达10%-100%。

Ø如果诱饵蛋白不存在自激活，反应2在SD-trp-leu-his和SD-trp-leu-his-ade培养基上应无显著生长。

欢迎百度搜索欧易生物——访问欧易生物官网——了解更多酵母文库、多组学技术

猜你想看

1、酵母杂交Tips6 顺式作用元件怎么看？

2、酵母杂交Tips5 筛库不长克隆原因排查

3、酵母杂交Tips4_蛋白跨膜域预

4、酵母杂交Tips3_酵母双杂交诱饵载体选择

原创声明：本文由欧易生物(OEBIOTECH)学术团队报道，本文著作权归文章作者所有。欢迎个人转发及分享，未经作者的允许禁止转载。

关键词： 细胞膜上 结构定位 是否正确

推荐DIY文章

主机存在磨损或划痕风险 PICO4便携包宣布召回

穿越湖海！特斯拉Cybertruck电动皮卡可以当“船”用

vivoXFold+折叠旗舰开售 配备蔡司全焦段旗舰四摄

飞凡R7正式上市 全系标配换电架构

中兴Axon30S开售 拥有黑色蓝色两款配色

荣耀MagicBookV14 2022正式开售 搭载TOF传感器