今日报丨酵母文库/酵母双杂交筛选/转录组测序发现小麦面包品质的调控机制-- 迪族网

今日报丨酵母文库/酵母双杂交筛选/转录组测序发现小麦面包品质的调控机制

来源：欧易生物　2022-08-29 09:31:04

前言

普通小麦（Triticum aestivum L.）是一种具有独特加工品质的重要粮食作物。其独特的加工质量来源于小麦种子贮藏蛋白(SSPs)，包括麦胶蛋白和谷氨酸蛋白（即谷蛋白），其中麦胶蛋白可以增强面团的粘性，而谷蛋白可以增强面团的弹性。SSP含量(即籽粒蛋白质含量；GPC)和组成是影响小麦加工质量的关键因素，从而影响小麦价格。因此，阐明介导SSP合成的机制是有必要的。

小麦谷蛋白由高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)和低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)组成，小麦SPA（storage protein activator）蛋白可以激活小麦HMW-GS和LMW-GS相关基因的转录，促进SSP积累。而小麦SPR（storage protein repressor）蛋白，属于NAC家族的TF，可以抑制SSP蛋白积累。

(相关资料图)

2022年7月，四川农业大学研究团队在International Journal of Molecular Sciences上发表了题为“The Q Allele Increases Wheat Bread-Making Quality by Regulating SPA and SPR”的研究论文，该研究发现了一个由错义突变产生的新的Q等位基因Q，通过性状分离观察发现单基因座的突变，影响了小麦穗密度和株高等性状，通过酵母双杂交筛选和转录组测序等实验，发现Q可以影响Q蛋白与SPA间的相互作用，并通过抑制SPR表达增加小麦SSP蛋白积累，提高面包品质。

本研究作者通过对比野生型小麦和普通小麦突变株系，发现突变株较野生型小麦矮、穗密度更高，但穗数、粒数、分蘖数没有显著差异。通过F2代分离比以及与突变体比较等，发现突变性状是由单基因座Cp5控制的。通过对的Q 基因克隆，序列比对和表达分析，发现在miRNA172结合区位点附近存在1个错义突变，产生的新的Q等位基因被命名为Q，且表达量高于野生型中的Q等位基因。对蛋白结构分析发现，相比Q蛋白，Q存在更多的氨基酸残基，可以在改变区域形成一个α-螺旋。

为了确定Q是否影响小麦加工质量，研究者比较了和WT的质量相关参数，发现的GPC值、湿面筋含量和Zeleny沉降值均高于WT，粒型小于WT，的平均面包体积比WT大20%等。

为阐明Q基因对小麦面包品质影响的机制，研究者以Q蛋白为诱饵通过酵母杂交筛选开花后14天小麦种子文库，结果共筛选到6个与Q蛋白互作的转录因子，其中1个为SPA。进一步研究发现，Q与SPA间的相互作用弱于Q蛋白与SPA的互作强度，且Q到Q的突变增强了SPA对LMW-GS基因表达的激活作用。

此外，通过分析和 WT的转录组数据，发现SPR表达量在两个样本间存在显著差异，说明Q蛋白通过调节SPR的表达来调控SSP基因的表达，通过qRT-PCR对此进行了验证。

Q等位基因对小麦性状及面包品质的影响

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关键词：等位基因加工质量相互作用

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